基于同源FRET的生物传感器及其在活细胞信号事件多重成像中的应用

抽象的

基于Förster共振能量转移（FRET）的生物传感器的多重成像有望成为监测单个活细胞内信号通路时空相关性的有效方法。本文探讨了基于同源FRET的生物传感器在多重成像方面的潜力。我们证明，用mCherry标记的Akt的pleckstrin同源结构域（Akt-PH）之间的同源FRET可用于监测活细胞中3'-磷酸肌醇的积累，并展示了如何利用时间分辨荧光各向异性测量的全局分析来量化这种积累。此外，我们还展示了利用TN-L15（一种基于CFP/YFP的异源FRET钙生物传感器）的荧光寿命测量，结合3'-磷酸肌醇的积累，对钙浓度进行多重成像读数。.