除了光学显微镜技术外,还需开发其他方法来直接观察相分离。在此背景下,需要克服荧光显微镜的局限性,因为添加的荧光染料会显著扰乱脂质的堆积。基于拉曼光谱的光学成像是一种很有前景的分析工具,可用于对脂质双层进行无标记化学特异性显微成像。在本研究中,我们展示了高光谱相干拉曼散射显微镜的应用,并结合我们自主开发的定量无监督数据分析方法,用于观察具有液序和液无序区域的单层平面膜双层中的脂质分离情况。我们使用了两台自主研发的仪器,分别采用相干反斯托克斯拉曼散射和受激拉曼散射模式。我们使用二油酰磷脂酰胆碱、鞘磷脂和胆固醇的三元混合物来形成相分离区域。结果表明,该方法能够以完全无标记的方式,在化学和空间上始终如一地分辨出各个区域。本文提供了各区域的定量拉曼磁化率光谱及其空间分辨浓度图。.