Abstracto
, junto con técnicas de microscopía óptica dirigidas a visualizar directamente la partición de fases. En este contexto, es necesario superar las limitaciones de la microscopía de fluorescencia, donde los fluoróforos añadidos pueden perturbar significativamente el empaquetamiento de lípidos. La imagen óptica basada en Raman es una herramienta analítica prometedora para la microscopía químicamente específica sin marcadores de bicapas lipídicas. En este trabajo, demostramos la aplicación de la microscopía de dispersión Raman coherente hiperespectral combinada con una metodología de análisis de datos cuantitativo no supervisado desarrollada internamente para visualizar la partición de lípidos en bicapas de membrana planas individuales que exhiben dominios líquido-ordenados y líquido-desordenados. Se utilizaron dos instrumentos de fabricación propia, que presentan modalidades de dispersión Raman anti-Stokes coherente y dispersión Raman estimulada. Se utilizaron mezclas ternarias de dioleoilfosfatidilcolina, esfingomielina y colesterol para formar dominios separados por fases. Demostramos que los dominios se resuelven de forma consistente, tanto química como espacialmente, sin necesidad de marcadores. Se proporcionan espectros cuantitativos de susceptibilidad Raman de los dominios junto con sus mapas de concentración con resolución espacial.
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